胰岛素是治疗糖尿病的重要药物。目前，人类已经成功的利用大肠杆菌生产出重组人胰岛素。请回答下列问题：
（1）用基因工程生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的_________，通过逆转录获得胰岛素基因，再利用__________技术扩增目的基因。胰岛素基因能被准确扩增的原因是________________。
（2）大肠杆菌常用作基因工程的受体菌，主要原因是_________________。
（3）为使人胰岛素基因在大肠杆菌体内成功表达，需要构建基因表达载体，在基因的首端需要添加人胰岛素基因的______________，其作用是__________________。
（4）从大肠杆菌中得到的胰岛素需经体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌_______。制备好的胰岛素通常要低温冷藏，过高的温度会使胰岛素的_____________被破坏，从而变性失活。
【答案】mRNA PCR 胰岛素基因提供了精确的复制模板；碱基互补配对原则保证复制准确的进行 结构简单、遗传物质相对较少；繁殖速度快 启动子 驱动目的基因（胰岛素基因） 转录出mRNA 没有内质网和高尔基体，不能对蛋白质进行加工 空间结构
【解析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
（1）用基因工程方法生产人胰岛素时，可先提取人胰岛B细胞中的mRNA，以其作为模板，在逆转录酶的作用下合成胰岛素基因，再通过PCR技术扩增胰岛素基因；胰岛素基因能被准确扩增的原因是：胰岛素基因提供了精确的复制模板；碱基互补配对原则保证复制准确的进行。
（2）大肠杆菌结构简单、遗传物质相对较少，繁殖速度快，常用作基因工程的受体菌。
（3）在构建基因表达载体时，需要在胰岛素基因的前面添加启动子，以驱动目的基因（胰岛素基因）转录形成mRNA。
（4）大肠杆菌没有内质网和高尔基体，不能对蛋白质进行加工，因此从大肠杆菌中得到的胰岛素需经体外加工才具有生物活性；高温会破坏胰岛素的空间结构，使得胰岛素变性失活。