萌发的小麦种子中淀粉酶活性较强,主要有α−淀粉酶和β−淀粉酶。α−淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β−淀粉酶不耐热,在70 ℃条件下15 min后失活。
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。
实验步骤:
步骤一:制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具刻度试管,编号,按表加入试剂,再将试管置于60 ℃水浴中加热2 min,取出后按试管号顺序排列。
步骤二:萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。
步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70 ℃水浴中15 min,取出后迅速冷却。
步骤四:另取四支试管,编号A、 B、C、D,向A、B试管中各加5 mL 5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2 mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40 ℃恒温水浴中保温10 min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40 ℃恒温水浴中保温10 min。
步骤五:取A、B试管中反应溶液各2 mL分别加入E、F试管,然后向E、F试管分别加入________,再置于_______,2 min后观察颜色变化。
结果将E试管中颜色与第一步中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α−淀粉酶催化效率。
请分析回答:
(1)本实验的目的是测定小麦种子中___________________________。
(2)步骤一的5∼7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是_______________(单位:mL)。
(3)实验中B试管所起的具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中__________________。
(4)请补全步骤五的做法__________________,___________________。
(5)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤________进行改变。
【答案】α-淀粉酶催化效率0.60.40是否存在还原糖2 mL斐林试剂60 ℃水浴加热三
【解析】本题主要考查实验设计中确定实验目的、控制变量、对照原则、结果分析等知识,意在考查考生对一些生物学问题进行初步探究的能力。
(1)淀粉在淀粉酶的作用下水解成麦芽糖,相同时间的产物生成量-麦芽糖量的多少可以代表淀粉酶的催化效率。
(2)根据表格数据可知,麦芽糖和蒸馏水的总量为2mL,故根据等量对照的原则,X、Y、Z的数量分别是0.6、0.4、0
(3)B是用来做对照,以排除淀粉溶液中还原糖的干扰。
(4)鉴定还原糖时,加入2ml斐林试剂,温水浴加热,观察有无生成砖红色沉淀。
(5)若测定另一种酶的活性,应用酸处理淀粉酶溶液,使α-淀粉酶失活。与上述操作一样同在第三步。