为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片段大小。下表是某小组进行的相关实验。
(1)该实验中体现出限制酶的作用特点是________________。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为______个和____个。
(3)根据表中数据,请在下图中用箭头标出相应限制酶的酶切位点。
(4)已知BamH I与BglⅡ的识别序列及切割位点如下图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHI和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干次循环后和_______序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。
【答案】(1)一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,且在特定的位点切割
(2)2 1
(3)
(4) 磷酸二酯键
【解析】(1)该实验中体现出限制酶的作用特点是酶的专一性.
(2)A酶切割后形成3段,所以有2个识别位点,B酶切割后形成2段,所以有1个切割位点.
(3)由于酶B只有一个限制酶切位点,即在2000和3000之间,可以先标注出;又由于酶A又可以将2000的这段切成500和1500的,结合酶A单独切割又可以标注其切割位点,同理标出另一个切割位点,答案如下图:
(4)巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示。用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后和序列明显增多。DNA连接酶催化形成的是磷酸二酯键。