随着社会的发展，石油产品的使用越来越多，石油烃污染也越来越严重。为了筛选出分解石油烃能力强的微生物，人们不断地进行研究。下图为获取能分离出分解石油烃的微生物的土壤样品后的研究过程，请回答有关问题：
(1)获取土壤样品的取样地点最好选在_________。为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①④所用的选择培养基只能以石油烃作为唯一碳源，其原因是_____________。
(2)根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是______________,若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液_____________。
(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_________。采用________方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误是_______________(写出一点即可)。
【答案】石油烃污染明显处 只有能利用石油烃的微生物能正常生长繁殖 涂布分离 进行（梯度）稀释 接种环 灼烧 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始划线
【解析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
（1）要获取相应的菌种，应到相应的环境中获取，获取土壤样品的取样地点最好选在石油污染明显处；有些培养基可以抑制其他微生物的生长，这样的培养基可称做选择培养基；因此，为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①一④所用培养基，其成分的特点是只含石油烃一种碳源，从而有利于目的菌的生长，抑制其他微生物的生长。
（2）④中的培养基从物理特征看属于固体培养基，可加入凝固剂琼脂处理，常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法；根据⑤平板上生长的菌落，对④进行接种采用的方法是涂布分离；若⑤中发现无法区分菌落，说明稀释度不够，可以将重新进行梯度稀释。
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是接种环，采用灼烧方法对其进行灭菌。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落；造成划线无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始划线。